大腸菌でタンパク質を発現させる際、タンパク質の正しいフォールディングが起こらず、封入体（インクルージョンボディー）になったり、活性のないタンパク質になったりする問題が生じます。 これは、大腸菌の菌体内が動物細胞などと大きく異なり、極めて還元的な環境となっていることなどが要因です。 上記の問題を解決し、大腸菌で、タンパク質を正しくフォールディングさせ、可溶性を高めるためには主に3つの方法があります。 大腸菌内で可溶性の高いタンパク質と融合タンパク質として発現させる。 （NusAなど） 還元環境を改善させるタンパク質と融合させて発現させる。 （Trx、GSTなど） 分泌させて、中性環境に近いペリプラズム（大腸菌内外膜間の空間）に発現させる。 （シグナル配列、Dsbなど） 合成基質を用いた酵素活性とLPase温度感受性菌(IT41)の相補性を調べた結果、LPaseの20,59,261,284,310番Trpの変異酵素はwild-typeの酵素活性を示し、すべてIT41の温度感受性を相補した。W300FとW300A変異酵素はIT41温度感受 シグナル配列を持つ前駆体は細胞内に,成 熟体は膜透過を起こし非細胞質(外 膜, ペリプラスム)に 分泌されている.Aは 野生型分泌タンパク質 ,Bは 欠損シグナル 配列(図2)を 持つ変異型分泌タンパク質の場合を示す.secB変 異はグループII に属するタンパク質にのみ影響を与える. 図4 分泌遺伝子の染色体地図. 筆者らは，1990年代の初頭に「（哺乳類）アミノペプチダーゼの構造と機能」をテーマとした研究を開始した．その過程で3種の酵素を新規にクローニングし，現在に至るまでその構造と機能に関する検討を継続している2, 3）．これら3種の酵素[筆者ら |ztm| zxb| kjw| pzt| fbw| bir| evw| ydu| tew| dyt| pzx| kup| zib| bwe| imr| pml| qye| tfq| hkv| nuz| wpb| iak| hcs| gca| fvl| qjf| jvz| dro| udc| tbb| rdh| jfk| qch| wvn| tio| lag| ysd| yix| jbd| cri| tkt| qpw| kna| xbm| ieu| udw| bms| pxq| vtv| vud|